• -Le contrôle qualité (rendement de marquage, proportion de pertechnétate libre i.e. [99mTc] réduit, non lié) du DPD [99mTc] marqué peut être réalisé en 10 minutes, 5 minutes après le marquage, à l'aide d'une chromatographie ascendante sur couche mince (plaques ITLC - Gelman SG) utilisant de la méthyléthylcétone ou de la solution d'acétate de sodium 1N en tant que solvant.
• -La méthyléthylcétone sépare quantitativement le pertechnétate libre situé sur la "ligne de front" (Rf 0,8-0,9) de la préparation DPD marquée à la "ligne de dépôt" (Rf 0,0-0,1) (début).
• -La solution d'acétate de sodium 1N sépare quantitativement le [99mTc] oxydé non lié (par exemple Tc(OH)n) déposé sur la "ligne de dépôt" (début) (Rf 0,0-0,1) du DPD marqué situé près de la "ligne de front" (Rf 0,8-0,9).
• -La distribution de l'activité sur le chromatogramme est enregistrée à l'aide d'un gamma-scanner sur couche mince. Vient ensuite le calcul mathématique du pourcentage des différents composants trouvés par rapport à l'activité totale appliquée.
• -Le rendement de marquage doit être au moins égal à 95% de l'activité totale appliquée, et le pourcentage de pertechnétate de Tc-99m libre et de Tc-99m oxydé non lié doit respectivement rester inférieur à respectivement 1% et 2%.
• -A l'exception des deux valeurs Rf évoquées sur les deux systèmes séparateurs, les chromatogrammes ne doivent présenter aucune trace d'autres composants marqués.
• +La qualité du marquage (pureté radiochimique) peut être contrôlée au choix selon l’une des deux méthodes suivantes :
• +Méthodes
• +Chromatographie sur couche mince ou chromatographie ascendante sur papier
• +Chromatographie sur couche mince
• +Matériel et réactifs:
• +1. Support à chromatographie : deux plaques de fibre de verre A et B recouvertes de gel de silice (ITLC-SG) préalablement chauffées à 110 °C pendant 10 min et ramenées à température ambiante avant utilisation.
• +Tracer à 2 cm de l'une des extrémités de chaque support une fine ligne dite "ligne de dépôt". Tracer à 15 cm de la "ligne de dépôt" une fine ligne dite "ligne de front de solvant".
• +2. Phases mobiles :
• +A : Solution d'acétate de sodium 1M
• +B : Méthyléthylcétone
• +3. Cuves à chromatographie
• +Deux cuves en verre A et B, dont les dimensions sont en rapport avec celles du support à utiliser, munies d’un couvercle assurant une fermeture étanche.
• +4. Divers Pinces, seringues, aiguilles, unité de comptage appropriée
• +Procédure
• +1. Introduire dans les cuves A et B un volume suffisant de la phase mobile correspondante.
• +2. A l'aide d'une seringue munie d’une aiguille, déposer une goutte de la solution à contrôler sur la "ligne de dépôt" de chaque plaque.
• +Procéder rapidement pour éviter toute dégradation de la solution.
• +3. A l'aide des pinces, introduire chaque plaque dans la cuve contenant la phase mobile correspondante, puis fermer le couvercle. Laisser le solvant migrer jusqu'à la "ligne de front de solvant".
• +4. A l'aide des pinces, retirer les plaques des cuves et les laisser sécher à l'air.
• +5. Déterminer la distribution de la radioactivité à l'aide d'un détecteur approprié.
• +Mesurer la radioactivité de chaque tâche par intégration des pics.
• +Avec la phase mobile A, le Rf du (99mTc) hydrolysé est 0.
• +Avec la phase mobile B, le Rf du (99mTc) libre est 1.
• +6. Calculs
• +% (99mTc) libre =
• +(image)
• +´ 100
• +% (99mTc) hydrolysé =
• +(image)
• +´ 100
• +% (99mTc)-DPD = 100 % - [% (99mTc) libre +% (99mTc) hydrolysé]
• +7. Le pourcentage de (99mTc)-DPD doit être au moins égal à 95 %, le pourcentage de (99mTc libre) ne doit pas excéder 2,0 % et le pourcentage de 99mTc hydrolysé ne doit pas excéder 2,0 %.
• +Chromatographie ascendante sur papier
• +Matériel et réactifs:
• +1. Systèmes chromatographiques
• +Système chromatographique A:
• +Support A : type Whatman 31ET
• +Phase mobile A : solution de chlorure de sodium 1M
• +Système chromatographique B:
• +Support B : type Whatman 1
• +Phase mobile B : méthyl éthyl cétone
• +Tracer à 2 cm de l'une des extrémités de chaque support une fine ligne dite "ligne de dépôt". Tracer à 10 cm de la "ligne de dépôt" une fine ligne dite "ligne de front de solvant".
• +2.Cuves à chromatographie
• +Deux cuves en verre A et B, dont les dimensions sont en rapport avec celles du support à utiliser, munies d’un couvercle assurant une fermeture étanche.
• +3. Divers Pinces, seringues, aiguilles, unité de comptage appropriée.
• +Procédure
• +1 Introduire dans les cuves A et B un volume suffisant de la phase mobile correspondante.
• +2. A l'aide d'une seringue munie d’une aiguille, déposer sur la "ligne de dépôt" de chaque plaque une goutte de la solution à contrôler.
• +Procéder rapidement pour éviter toute dégradation de la solution.
• +3. A l'aide des pinces, introduire chaque plaque dans la cuve contenant la phase mobile correspondante puis fermer le couvercle. Laisser le solvant migrer jusqu'à la "ligne de front de solvant".
• +4. A l'aide des pinces, retirer les supports et les laisser sécher à l’air.
• +5. Déterminer la distribution de la radioactivité à l'aide d'un détecteur approprié.
• +Mesurer la radioactivité de chaque tâche par intégration des pics.
• +Le Rf du (99mTc) libre est 1 avec le système B et celui du (99mTc) hydrolysé est 0 avec le système A.
• +6. Calculs
• +% (99mTc) libre =
• +(image)
• +´ 100
• +% (99mTc) hydrolysé =
• +(image)
• +´ 100
• +% (99mTc)-DPD = 100 % - [% (99mTc) libre + % (99mTc) hydrolysé]
• +7. Le pourcentage de (99mTc)-DPD doit être au moins égal à 95 %, le pourcentage de (99mTc) libre ne doit pas excéder 2,0 % et le pourcentage de (99mTc) hydrolysé ne doit pas excéder 2,0 %.
• -Mai 2004
• +Mai 2013